I. Achoimre
Is macramóilíní speisialta iad peptides sa chaoi is go bhfuil a gcuid seichimh neamhghnách ina ngnéithe ceimiceacha agus fisiceacha.Tá sé deacair roinnt peptides a shintéisiú, agus tá cinn eile sách éasca a shintéisiú ach deacair a íonú.Is í an fhadhb phraiticiúil ná go bhfuil an chuid is mó de na peptídí beagán intuaslagtha i réitigh uiscí, agus mar sin inár n-íonú, ní mór an chuid comhfhreagrach den peptide hidreafóbach a thuaslagadh i dtuaslagóirí neamh-uiscí, Dá bhrí sin, is dócha go mbeidh na tuaslagóirí nó na maoláin seo go mór ar neamhréir leis an úsáid. de nósanna imeachta turgnamhacha bitheolaíocha, ionas go mbeidh toirmeasc dian ar theicneoirí an peptide a úsáid chun a gcríoch féin, ionas go mbeidh na gnéithe seo a leanas roinnt gnéithe de dhearadh peptides do thaighdeoirí.
Scéim deartha agus réiteach slabhra peptide polypeptide....
Dara, an rogha ceart peptides deacair sintéiseacha
1. Fad iomlán na seicheamh síos-rialaithe
Tá sé níos éasca peptides níos lú ná 15 iarmhar a fháil toisc go n-ardaíonn méid an pheptíde agus go laghdaítear íonacht an táirge amh.De réir mar a mhéadaíonn fad iomlán na slabhra peptide níos mó ná 20 iarmhar, is ábhar imní é cainníocht chruinn an táirge.I go leor turgnaimh, tá sé éasca éifeachtaí gan choinne a fháil tríd an líon iarmhar a ísliú faoi 20.
2. Laghdú ar líon na n-iarmhar hidreafóbach
Is gnách go mbíonn deacrachtaí sintéiseacha ag peptides le barrachas mór iarmhair hidreafóbach, go háirithe sa réigiún 7-12 iarmhair ón C-críochfort.Breathnaítear air seo mar mheascán neamhleor go beacht toisc go bhfaightear bileog B-huaire sa tsintéis.“I gcásanna den sórt sin, d’fhéadfadh sé a bheith úsáideach níos mó ná dhá iarmhar dearfacha agus diúltacha a thiontú, nó Gly nó Pro a chur isteach sa pheptíd chun comhdhéanamh na peptide a dhíghlasáil.”
3. Iarmhair “deacair” a ísrialáil
“Tá roinnt iarmhair Cys, Met, Arg, agus Try ann nach ndéantar de ghnáth a shintéisiú go héasca.”Úsáidfear ser de ghnáth mar mhalairt neamhocsaídeach ar Cys.
Scéim deartha agus réiteach slabhra peptide polypeptide....
Sa tríú háit, feabhas a chur ar an rogha ceart intuaslagtha in uisce
1. Coigeartaigh an foirceann N nó C
I gcomparáid le peptídí aigéadacha (is é sin, luchtaithe go diúltach ag pH 7), moltar go háirithe aicéitiliú (aicéitilation N-terminus, C foirceann i gcónaí ag cothabháil grúpa carboxyl saor) chun an muirear diúltach a mhéadú.Mar sin féin, le haghaidh peptídí bunúsacha (is é sin, a ghearrtar go dearfach ag pH 7), moltar go háirithe amination (aimínghrúpa saor in aisce ag an gcríochfort N agus amination ag an C-terminus) chun an muirear dearfach a mhéadú.
2. Giorraigh nó fadaigh an seicheamh go mór
Tá líon mór aimínaigéid hidreafóbach i gcuid de na sraitheanna, mar shampla Trp, Phe, Val, Ile, Leu, Met, Tyr agus Ala, etc. Nuair a bhíonn na hiarmhair hidreafóbach seo níos mó ná 50%, de ghnáth ní bhíonn siad éasca a dhíscaoileadh.D'fhéadfadh sé a bheith úsáideach an seicheamh a fhadú chun cuaillí dearfacha agus diúltacha an pheptíde a mhéadú tuilleadh.Is é an dara rogha ná méid an tslabhra peptíde a íosrialáil chun na cuaillí dearfacha agus diúltacha a mhéadú trí na hiarmhair hidreafóbach a íosrialáil.Dá láidre taobhanna dearfacha agus diúltacha an slabhra peptide, is mó an seans go n-imoibreoidh sé le huisce.
3. Cuir isteach iarmhar intuaslagtha in uisce
I gcás roinnt slabhraí peptide, is féidir leis an meascán de roinnt aimínaigéid dearfacha agus diúltacha an tuaslagthacht uisce a fheabhsú.Molann ár gcuideachta an N-terminus nó C-terminus de pheptídí aigéadacha a chomhcheangal le Glu-Glu.Tugadh foirceann N nó C an bhun-pheptíde agus ansin Lys-Lys.Mura féidir an grúpa luchtaithe a chur, is féidir Ser-Gly-Ser a chur i gcríochfort N nó C freisin.Mar sin féin, ní oibríonn an cur chuige seo nuair nach féidir taobhanna an slabhra peptide a athrú.
Am postála: Bealtaine-12-2023