Is aicme de chomhdhúile iad peptides a fhoirmítear trí aimínaigéid iolracha a nascadh trí bhannaí peiptíde.Tá siad uileláithreach in orgánaigh bheo.Go dtí seo, fuarthas na mílte peptides in orgánaigh bheo.Tá ról tábhachtach ag peptides maidir le gníomhaíochtaí feidhmiúla córais éagsúla, orgáin, fíocháin agus cealla agus i ngníomhaíochtaí saoil a rialáil, agus is minic a úsáidtear iad in anailís fheidhmiúil, taighde antasubstainte, forbairt drugaí agus réimsí eile.Le forbairt na biteicneolaíochta agus na teicneolaíochta sintéise peptide, tá níos mó agus níos mó drugaí peptide forbartha agus curtha i bhfeidhm sa chlinic.
Tá éagsúlacht leathan de mhodhnuithe peptide ann, ar féidir iad a roinnt go simplí i modhnú iar-agus modhnú próisis (ag baint úsáide as modhnú aimínaigéad díorthaithe), agus modhnú N-críochfort, modhnú C-críochfort, modhnú slabhra taobh, modhnú aimínaigéad, modhnú cnámharlaigh, etc., ag brath ar an suíomh modhnú (Fíor 1).Mar mhodh tábhachtach chun an príomh-struchtúr slabhra nó grúpaí slabhra taobh de shlabhraí peptide a athrú, is féidir le modhnú peptide airíonna fisiceacha agus ceimiceacha na gcomhdhúile peptide a athrú go héifeachtach, tuaslagthacht uisce a mhéadú, an t-am gníomhaíochta in vivo a fhadú, a dáileadh bitheolaíoch a athrú, deireadh a chur le immunogenicity. , fo-iarsmaí tocsaineacha a laghdú, etc. Sa pháipéar seo, tugtar isteach roinnt straitéisí modhnú peptide móra agus a saintréithe.
1. Rothaíocht
Tá go leor iarratais ag peptídí timthriallacha i mbithmhíochaine, agus is peiptídí timthriallacha iad go leor peptídí nádúrtha le gníomhaíocht bhitheolaíoch.Toisc go mbíonn claonadh níos déine ag peiptídí timthriallacha ná peiptídí líneacha, tá siad thar a bheith frithsheasmhach in aghaidh an chórais díleá, is féidir leo maireachtáil sa chonair díleá, agus léiríonn siad cleamhnas níos láidre le haghaidh gabhdóirí sprice.Is é an cyclization an bealach is dírí chun peptídí timthriallacha a shintéisiú, go háirithe do pheptídí a bhfuil cnámharlach struchtúrach mór acu.De réir an mhodha cyclization, is féidir é a roinnt ina chineál slabhra taobh slabhra taobh, críochfort - cineál slabhra taobh, críochfort - cineál críochfoirt (cineál deireadh go deireadh).
(1) sidechain-go-sidechain
Is é an cineál ciorraithe taobh slabhra go taobh-shlabhra is coitianta ná idirlinne disulfide idir iarmhair chistéin.Tugtar isteach an timthriallú seo nuair a dhéantar péire iarmhar cistéin a dhíchosaint agus ansin ocsaídítear iad chun bannaí déshilfíde a dhéanamh.Is féidir sintéis polycyclic a bhaint amach trí bhaint roghnach de ghrúpaí cosanta sulfhydryl.Is féidir timthriallú a dhéanamh i dtuaslagóir iar-dhíthiomsaithe nó ar roisín réamh-dhíthiomsaithe.D’fhéadfadh sé nach mbeadh timthriallú ar roisíní chomh héifeachtach ná ciorclaíocht tuaslagóirí toisc nach furasta na peptídí ar roisíní a fhoirmiú i gcomhréir le himircigh.Is éard atá i gcineál eile taobh-shlabhra - cyclization slabhra taobh ná struchtúr aimíde a fhoirmiú idir aigéad aspartic nó iarmhar aigéad glútamach agus an bonn aimínaigéad, rud a éilíonn go gcaithfidh an grúpa cosanta slabhra taobh a bheith in ann a bhaint go roghnach as an polypeptide ach an oiread. ar an roisín nó tar éis dissociation.Is é an tríú cineál ciorcail slabhra taobh-shlabhra ná foirmiú éitear défheinile ag tyrosine nó p-hydroxyphenylglycine.Ní fhaightear an cineál ciorraithe seo i dtáirgí nádúrtha ach amháin i dtáirgí miocróbach, agus is minic a bhíonn luach míochaine féideartha ag táirgí cyclization.Éilíonn ullmhú na gcomhdhúile seo coinníollacha imoibrithe uathúla, mar sin ní minic a úsáidtear iad i sintéis na peptides traidisiúnta.
(2) críochfort-go-sidechain
De ghnáth is éard atá i gceist le timthriallú slabhra taobh críochfoirt an C-críochfort leis an ngrúpa aimín den slabhra taobh lísín nó ornithín, nó an N-críochfort leis an slabhra taobh aigéad aspartic nó aigéad glútamach.Déantar timthriallú polaipeiptíde eile trí bhannaí éitear a fhoirmiú idir teirminéil C agus slabhraí taobh serine nó threonine.
(3) Cineál críochfoirt nó ceann-go-eireaball
Is féidir polaipeiptídí slabhra a thimthriall i dtuaslagóir nó iad a shocrú ar roisín trí thimthriall slabhra taobh.Ba cheart tiúchan íseal peptídí a úsáid i lárú tuaslagóirí chun oligomerization peptídí a sheachaint.Braitheann toradh polaipeiptíde fáinne sintéiseach ceann-go-eireaball ar sheicheamh na polaipeiptíde slabhra.Dá bhrí sin, sula n-ullmhaítear peptídí timthriallacha ar scála mór, ba cheart leabharlann de pheptídí luaidhe slabhraithe féideartha a chruthú ar dtús, agus ina dhiaidh sin cyclization chun an seicheamh a aimsiú leis na torthaí is fearr.
2. N-meitilation
Tarlaíonn N-meitilation ar dtús i peptídí nádúrtha agus tugtar isteach é i sintéis peptide chun cosc a chur ar fhoirmiú bannaí hidrigine, rud a fhágann go bhfuil peptides níos resistant do bhith-dhíghrádú agus imréiteach.Is é an modh is tábhachtaí ná peptídí a shintéisiú ag baint úsáide as díorthaigh aimínaigéad N-methylated.Ina theannta sin, is féidir imoibriú Mitsunobu de chlóiríd N-(2-nitrobenzene sulfonyl sulfonyl) polypeptide-roisín idirmheánacha le meatánól a úsáid freisin.Baineadh úsáid as an modh seo chun leabharlanna peptide timthriallacha a ullmhú ina bhfuil aimínaigéid N-mheitiolaithe.
3. Fosfarylation
Tá fosfarylation ar cheann de na modhnuithe iar-aistrithe is coitianta sa nádúr.I gcealla daonna, déantar níos mó ná 30% de phróitéiní a phosphorylated.Tá ról tábhachtach ag fosfarylation, go háirithe fosfarylation inchúlaithe, maidir le go leor próisis cheallacha a rialú, mar shampla trasduchtúchán comhartha, léiriú géine, timthriall cille agus rialáil cíteischnámharlaigh, agus apoptosis.
Is féidir fosfarylation a thabhairt faoi deara ag iarmhair aimínaigéad éagsúla, ach is iad na spriocanna fosfarylation is coitianta ná iarmhair serine, threonine, agus tyrosine.Is féidir díorthaigh phosphotyrosine, phosphothreonine, agus phosphoserine a thabhairt isteach i peptides le linn sintéise nó a fhoirmiú tar éis sintéis peptide.Is féidir fosfarylation roghnach a bhaint amach trí úsáid a bhaint as iarmhair serine, threonine, agus tyrosine a bhaintear grúpaí cosanta go roghnach.Is féidir le roinnt imoibrithe fosfarylation grúpaí d'aigéad fosfarach a thabhairt isteach sa pholaipeiptíde trí iar-mhodhnú freisin.Le blianta beaga anuas, baineadh amach fosfarylation suíomh-shonrach de lísín trí úsáid a bhaint as imoibriú Staudinger-fosfít atá roghnaithe go ceimiceach (Fíor 3).
4. Myristoylation agus palmitoylation
Ligeann aiciliú an chríochfoirt N le haigéid shailleacha do pheptídí nó próitéiní ceangal le seicní cille.Cuireann an seicheamh miridamoylated ar an gcríochfort N ar chumas kinases próitéin teaghlaigh Src agus próitéiní droim ar ais transcriptase Gaq a dhíriú chun ceangal le seicní cille.Bhí aigéad myristic nasctha le N-críochfort an roisín-polypeptide ag baint úsáide as imoibrithe cúplála caighdeánach, agus d'fhéadfadh an lipopeptide iarmhartach a dhícheangal faoi choinníollacha caighdeánacha agus íonaithe ag RP-HPLC.
5. Glycosylation
Is antaibheathaigh thábhachtacha iad glycopeptides cosúil le vancomycin agus teicolanin chun cóireáil a dhéanamh ar ionfhabhtuithe baictéaracha atá resistant ó dhrugaí, agus is minic a úsáidtear glycopeptides eile chun an córas imdhíonachta a spreagadh.Ina theannta sin, ós rud é go bhfuil go leor antaiginí miocróbach glycosylated, tá tábhacht mhór staidéar a dhéanamh ar glycopeptides chun éifeacht theiripeach an ionfhabhtaithe a fheabhsú.Ar an láimh eile, fuarthas amach go léiríonn na próitéiní ar membrane cille na gcealla meall glycosylation neamhghnácha, rud a fhágann go bhfuil ról tábhachtach ag glycopeptides i dtaighde cosanta imdhíonachta ailse agus meall.Ullmhaítear glycepeiptíde trí mhodh Fmoc/t-Bu.Is minic a thugann fMOCanna gníomhachtaithe eistir pentafluorophenol isteach iarmhair glycosylated, mar threonine agus serine, chun aimínaigéid glycosylated a chosaint.
6. Iseapréin
Tarlaíonn isopentadienylation ar iarmhair cistéin sa slabhra taobh in aice leis an C-críochfort.Is féidir le isoprene próitéin cleamhnas membrane cille a fheabhsú agus idirghníomhaíocht próitéine-próitéin a fhoirmiú.Áirítear le próitéiní isopentadienated tyrosine phosphatase, GTase beag, móilíní cochaperone, lamina núicléach, agus próitéiní ceangailteach centromeric.Is féidir polaipeiptíde isoprene a ullmhú trí úsáid a bhaint as isoprene ar roisíní nó trí dhíorthaigh cistéin a thabhairt isteach.
7. Modhnú glycol poileitiléin (PEG).
Is féidir modhnú PEG a úsáid chun cobhsaíocht hidrealaíoch próitéin, bithdháileadh agus tuaslagthacht peptide a fheabhsú.Is féidir feabhas a chur ar a n-airíonna cógaseolaíochta trí shlabhraí PEG a thabhairt isteach chuig peiptídí agus bac a chur ar hidrealú peiptídí ag einsímí próitéalaíocha.Téann peptídí PEG tríd an trasghearradh ribeach glomerular níos éasca ná na gnáthpheiptídí, rud a laghdaíonn imréiteach duánach go mór.Mar gheall ar leathré gníomhach leathnaithe peptídí PEG in vivo, is féidir an gnáthleibhéal cóireála a choinneáil le dáileoga níos ísle agus le drugaí peptide nach bhfuil chomh minic.Mar sin féin, tá éifeachtaí diúltacha ag modhnú PEG freisin.Coscann méideanna móra PEG an einsím as an peptide a dhíghrádú agus laghdaítear freisin ceangailteach an pheptíde leis an nglacadóir sprice.Ach is gnách go ndéantar cleamhnas íseal peptídí PEG a fhritháireamh ag a leathré cógaschinéiteach níos faide, agus trí bheith i láthair sa chorp níos faide, tá dóchúlacht níos mó ag peptidí PEG go n-ionsúfar iad isteach i spriocfhíocháin.Dá bhrí sin, ba cheart sonraíochtaí polaiméire PEG a bharrfheabhsú le haghaidh na dtorthaí is fearr.Ar an láimh eile, carnann peptídí PEG san ae mar gheall ar imréiteach duánach laghdaithe, rud a fhágann siondróm macromóilíní.Dá bhrí sin, ní mór modhnuithe PEG a dhearadh níos cúramaí nuair a úsáidtear peptídí le haghaidh tástála drugaí.
Is féidir grúpaí modhnuithe coitianta de mhodhnóirí PEG a achoimriú go garbh mar seo a leanas: Amino (-amine) -NH2, aminomethyl-Ch2-NH2, hydroxy-OH, carboxy-Cooh, sulfhydryl (-Thiol) -SH, Maleimide -MAL, succinimide carbónáit - SC, aicéatáit succinimide -SCM, succinimide propionate -SPA, n-hydroxysuccinimide -NHS, Acrylate-ch2ch2cooh, aldehyde -CHO (cosúil le propional-ald, butyrALD), bonn aicrileach (-acrylate-acrl), azido-azide, biotinyl - Biotin, Fluorescein, glutaryl -GA, Hiodrazíd Aicrioláit, ailcín-alcine, p-toluenesulfonate -OTs, succinimide succinate -SS, etc. Is féidir díorthaigh PEG le haigéid charbocsaileacha a chomhcheangal le haimíní n-críochfoirt nó le slabhraí taobh lísín.Is féidir PEG aimín-ghníomhachtaithe a chomhcheangal le slabhraí taobh aigéad aspartic nó aigéad glútamach.Is féidir PEG Mal-ghníomhachtaithe a chomhchuingeach le mercaptan de shlabhraí taobh-chistéin atá díchosanta go hiomlán [11].Aicmítear modhnóirí PEG go coitianta mar seo a leanas (nóta: Is é mPEG methoxy-PEG, CH3O-(CH2CH2O)n-CH2CH2-OH):
(1) modhnóir PEG slabhra díreach
mPEG-SC, mPEG-SCM, mPEG-SPA, mPEG-OTs, mPEG-SH, mPEG-ALD, mPEG-butyrALD, mPEG-SS
(2) modhnóir PEG défheidhmeach
HCOO-PEG-COOH, NH2-PEG-NH2, OH-PEG-COOH, OH-PEG-NH2, HCl·NH2-PEG-COOH, MAL-PEG-NHS
(3) Branching PEG modhnóir
(mPEG)2-NHS, (mPEG)2-ALD, (mPEG)2-NH2, (mPEG)2-MAL
8. Biotinization
Is féidir biotin a cheangal go láidir le avidin nó streptavidin, agus tá an neart ceangailteach fiú gar do bhanna comhfhiúsach.Úsáidtear peiptídí lipéadaithe biotin go coitianta in imdhíon-mheas, histocytochemistry, agus cíteiméadracht sreabhadh bunaithe ar fhluaraiseacht.Is féidir antasubstaintí antaibheathaigh lipéadaithe a úsáid freisin chun peiptídí biotinylated a cheangal.Is minic a bhíonn lipéid biotin ceangailte leis an slabhra taobh lísín nó leis an gcríochfort N.Is minic a úsáidtear aigéad 6-aminocaproic mar nasc idir peptides agus biotin.Tá an banna solúbtha i gceangal leis an tsubstráit agus ceanglaíonn sé níos fearr i láthair bac steric.
9. Lipéadú fluaraiseacha
Is féidir lipéadú fluaraiseacha a úsáid chun polaipéiptíde i gcealla beo a rianú agus chun staidéar a dhéanamh ar einsímí agus ar mheicníochtaí gníomhaíochta.Is fluaraiseacha é Tryptophan (Trp), mar sin is féidir é a úsáid le haghaidh lipéadú intreach.Braitheann speictream astaíochta tryptophan ar an timpeallacht imeallach agus laghdaítear é le polaraíocht tuaslagóra ag laghdú, maoin atá úsáideach chun struchtúr peptíde agus ceangailteach gabhdóirí a bhrath.Is féidir fluaraiseacht tryptophan a mhúchadh le haigéad aspartach prótónáit agus aigéad glútamach, rud a d'fhéadfadh teorainn a chur lena úsáid.Tá an grúpa clóiríd Dansyl (Dansil) an-fluaraiseach nuair a bhíonn sé ceangailte le aimínghrúpa agus is minic a úsáidtear é mar lipéad fluaraiseacha d’aimínaigéid nó próitéiní.
Athshondas fhluaraiseachta Tá comhshó fuinnimh (FRET) úsáideach le haghaidh staidéir einsíme.Nuair a chuirtear FRET i bhfeidhm, is gnách go mbíonn grúpa lipéadaithe fluaraiseachta agus grúpa múchadh fluaraiseachta san fhoshraith polaipeiptíde.Múchadh grúpaí fluaraiseacha lipéadaithe ag an múchadh trí aistriú fuinnimh neamh-fótóin.Nuair a dhéantar an peptide a dhícheangal ón einsím atá i gceist, astaíonn an grúpa lipéadaithe fluaraiseacht.
10. Polaipeiptíde Cage
Tá grúpaí cosanta optúla inbhainte ag peptídí cage a dhéanann an peptide a chosaint ó cheangal ar an ngabhdóir.Nuair a bhíonn sé faoi lé radaíochta UV, cuirtear an peptide i ngníomh, ag athbhunú a chleamhnas leis an receptor.Toisc gur féidir an gníomhachtú optúil seo a rialú de réir am, aimplitiúid, nó suíomh, is féidir peptídí cage a úsáid chun staidéar a dhéanamh ar imoibrithe a tharlaíonn i gcealla.Is iad na grúpaí cosanta is coitianta a úsáidtear le haghaidh polaipeiptídí cage ná grúpaí 2-nitrobenzyl agus a gcuid díorthach, ar féidir iad a thabhairt isteach i sintéis peptíde trí dhíorthaigh aimínaigéad cosanta.Is iad na díorthaigh aimínaigéad a forbraíodh ná lísín, cistéin, serine, agus tyrosine.Ní úsáidtear díorthaigh asparáit agus glutamáit go coitianta, áfach, toisc go bhfuil siad so-ghabhálach do chiciliú le linn sintéise agus díthiomsú peptide.
11. Peptíde polyantigenic (MAP)
De ghnáth ní bhíonn peptides gearr imdhíonachta agus ní mór iad a chomhcheangal le próitéiní iompróra chun antasubstaintí a tháirgeadh.Tá peptide polyantigenic (MAP) comhdhéanta d'il-pheptídí comhionanna atá ceangailte le núicléis lísín, ar féidir leo imdhíon-ghiní ard-chumhachta a chur in iúl go sonrach agus is féidir iad a úsáid chun cupáin próitéin iompróirí peiptíde a ullmhú.Is féidir polypeptides MAP a shintéisiú trí shintéis chéim soladach ar roisín MAP.Mar sin féin, cuireann cúpláil neamhiomlán slabhraí peptide ar iarraidh nó teasctha ar roinnt brainsí agus mar sin ní léiríonn sé airíonna an pholaipeiptíde MAP bunaidh.Mar mhalairt air sin, is féidir peptides a ullmhú agus a íonú ar leithligh agus ansin iad a chomhcheangal le MAP.Tá an t-ord peptíde a ghabhann leis an gcroílár peptide dea-shainithe agus go héasca tréithrithe ag mais-speictriméadracht.
Conclúid
Is modh tábhachtach é modhnú peptides chun peptídí a dhearadh.Ní féidir le peptídí atá modhnaithe go ceimiceach, ní hamháin ardghníomhaíocht bhitheolaíoch a chothabháil, ach freisin na míbhuntáistí a bhaineann le himdhíonacht agus tocsaineacht a sheachaint go héifeachtach.Ag an am céanna, is féidir le modhnú ceimiceach peptides a dheonú le roinnt airíonna nua den scoth.Le blianta beaga anuas, tá an modh gníomhachtaithe CH d'iar-mhodhnú polypeptides forbartha go tapa, agus baineadh amach go leor torthaí tábhachtacha.
Am postála: Mar-20-2023