Fadhbanna agus réitigh ar shintéis peiptíde fada

I dtaighde bitheolaíoch, is iondúil go n -úsáidtear polaipeiptídí le seicheamh fada. I gcás peiptídí le níos mó ná 60 aimínaigéad sa seicheamh, úsáidtear léiriú géine agus SDS-PAGE go ginearálta chun iad a fháil. Mar sin féin, tógann an modh seo tamall fada agus níl an éifeacht idirscartha táirge deiridh go maith.

Dúshláin agus réitigh do shintéis peptide fada

I sintéis na peiptídí fada, tá fadhb againn i gcónaí, is é sin, méadaíonn an bac steiriúil ar an imoibriú comhdhlúthaithe leis an méadú ar an seicheamh sa shintéis, agus ní mór an t -am imoibriúcháin a choigeartú chun an t -imoibriú a chur i gcrích. Mar sin féin, is ea is faide an t -am imoibriúcháin, déantar na fo -iarsmaí níos mó, agus cruthaítear cuid den sprioc peptide. Iarmhair den sórt sin - is príomh -eisíontais iad na slabhraí peiptíde easnamhacha a tháirgtear i sintéis peptide fada. Dá bhrí sin, i sintéis peiptíde fada, is é an phríomhfhadhb a chaithfimid a shárú ná na coinníollacha imoibriúcháin agus na modhanna imoibriúcháin ardchaighdeáin a fhiosrú, chun an t -imoibriú comhdhlúthaithe aimínaigéid a dhéanamh níos cuimsithí agus níos iomláine. Ina theannta sin, laghdaigh an t-am imoibriúcháin, mar is faide an t-am imoibriúcháin, na frithghníomhartha taobh níos neamhrialaithe, is ea is casta na seachtháirgí. Dá bhrí sin, déantar achoimre ar na trí phointe seo a leanas:

Is féidir sintéis MICREATHONNACH a úsáid: I gcás roinnt aimínaigéid a bhíonn sa phróiseas sintéise nach bhfuil éasca a bheith comhtháite, is féidir sintéis micreathonnach a úsáid. Tá torthaí suntasacha ag an modh seo, agus laghdaíonn sé go mór an t-am imoibriúcháin, agus laghdaíonn sé foirmiú dhá phríomhtháirge.

Is féidir modh sintéise blúire a úsáid: Nuair a bhíonn sé deacair roinnt peiptídí a shintéisiú trí mhodhanna coitianta sintéise agus nach bhfuil sé éasca iad a íonú, is féidir linn comhdhlúthú iomlán roinnt aimínaigéid a ghlacadh i deighleog áirithe den peiptíd go dtí an slabhra peiptíde ina iomláine. Is féidir leis an modh seo go leor fadhbanna a réiteach sa sintéis freisin.

Is féidir sintéis acylhydrazide a úsáid. Bunaithe ar shuíomh Cys sa slabhra peiptíde, roinneann an modh seo an slabhra peiptíde iomlán ina sraitheanna éagsúla agus déanann sé iad a shintéisiú faoi seach. Ar deireadh, faightear an sprioc peiptíde trí imoibriú comhdhlúthaithe céim leachtach. Ní hamháin go laghdaíonn an modh seo go mór an t -am sintéise a bhaineann le peiptíd fhada, ach méadaíonn sé go mór freisin íonacht an táirge deiridh.

Íonú peptide fada

Is cinnte go mbíonn comhpháirteanna casta de pheiptídí amh mar thoradh ar shainiúlacht na peiptídí fada. Dá bhrí sin, is dúshlán é freisin peiptídí fada a íonú ag HPLC. Sraith amyloid de phróiseas íonúcháin polaipeiptíde, ag ionsú a lán taithí agus a úsáidtear go rathúil chun peiptíd fhada a íonú. Trí threalamh nua a ghlacadh, trí chórais íonaithe iolracha a mheascadh, trí dheighilt arís agus arís eile agus modhanna taithí eile, cuireadh feabhas mór ar ráta ratha íonú peptide fada.