Mar ionstraim ardchruinnithe, is féidir le HPLC roinnt fadhbanna beaga trioblóideacha a bheith mar thoradh air mura n-oibrítear é ar an mbealach ceart le linn úsáide. Ceann de na fadhbanna is coitianta ná an fhadhb chomhbhrúite colúin. Conas crómatagraf lochtach a réiteach go tapa. Is éard atá sa chóras HPLC go príomha ná buidéal taiscumar, caidéal, instealladh, colún, seomra teochta colúin, brathadóir agus córas próiseála sonraí. Maidir leis an gcóras iomlán, is iad na colúin, na caidéil agus na brathadóirí na príomh -chomhpháirteanna agus na príomhláithreacha a bhfuil fadhbanna acu.
Is é an eochair do bhrú colúin an limistéar a dteastaíonn aird ghéar air agus HPLC á úsáid. Tá dlúthbhaint ag cobhsaíocht bhrú na gcolún le cruth buaic chrómatagrafaíochta, le héifeachtúlacht colúin, le héifeachtúlacht idirscartha agus le ham coinneála. Ní chiallaíonn cobhsaíocht brú colúin go bhfuil an luach brú cobhsaí ag luach cobhsaí, ach go bhfuil an raon luaineachta brú idir 345kpa nó 50psi (ag ceadú úsáid truaillithe grádáin nuair a bhíonn brú an cholúin cobhsaí agus ag athrú go mall). Is fadhb brú colúin é brú ró -ard nó ró -íseal.
An ceann is mó seans ann go dtarlóidh teipeanna agus réitigh HPLC
1, is é brú ard an fhadhb is coitianta in úsáid HPLC. Ciallaíonn sé seo ardú tobann i mbrú. Go ginearálta, tá na cúiseanna seo a leanas ann: (1) Go ginearálta, tá sé seo mar gheall ar bhac cainéal sreafa. Ag an bpointe seo, ba cheart dúinn é a scrúdú de réir a chéile. a. Ar an gcéad dul síos, gearr an t -ionraoin den chaidéal folúis. Ag an bpointe seo, líonadh an feadán peek le leacht ionas go raibh an feadán peek níos lú ná an buidéal tuaslagóra chun a fháil amach an raibh an leacht ag sileadh ag uacht. Mura bhfuil an leacht ag sileadh nó ag sileadh go mall, cuirtear bac ar cheann an scagaire tuaslagóra. Cóireáil: Soak in 30% aigéad nítreach ar feadh leathuaire agus sruthlaigh le huisce ultrapure. Má thiteann an leacht go randamach, tá an ceann scagaire tuaslagóra gnáth agus tá sé á sheiceáil; b. Oscail an comhla purge ionas nach dtéann an chéim shoghluaiste tríd an gcolún, agus mura bhfuil an brú laghdaithe go mór, cuirtear bac ar an gceann bán scagtha. Cóireáil: Baineadh na cinn bhána scagtha agus baineadh amach iad le 10% isopropanol ar feadh leathuair an chloig. Ag glacadh leis go dtiteann an brú faoi bhun 100psi, tá an ceann bán scagtha gnáth agus tá sé á sheiceáil; c. Bain an deireadh amach as an gcolún, mura laghdaíonn an brú, cuirtear bac ar an gcolún. Cóireáil: Má tá sé ina bhac salann maolánach, sruthlaigh 95% go dtí go bhfuil an brú gnáth. Má tá an bacainn mar thoradh ar ábhar níos caomhnaithe, ba chóir sreabhadh níos láidre ná an chéim soghluaiste reatha a úsáid chun an gnáthbhrú a bhrú. Mura laghdaíonn an brú glantacháin fadtéarmach de réir an mhodha thuas, is féidir a mheas go bhfuil ionraoin agus asraon an cholúin ceangailte leis an ionstraim ar a mhalairt, agus is féidir an colún a ghlanadh leis an gcéim shoghluaiste. Ag an am seo, mura laghdaítear brú an cholúin go fóill, ní féidir an pláta criathar iontrála colúin a athsholáthar ach amháin, ach nuair nach bhfuil an oibríocht go maith, is furasta laghdú a dhéanamh ar éifeacht an cholúin, mar sin déan iarracht níos lú a úsáid. Maidir le fadhbanna deacra, is féidir athsholáthar na gcolún a bhreithniú.
(2) Socrú ráta sreafa mícheart: Is féidir an ráta sreafa ceart a athshocrú.
. Más féidir, is féidir tuaslagóirí slaodachta níos ísle a athsholáthar nó a athshocrú agus a ullmhú.
.
2, is gnách go mbíonn an brú ró -íseal (1) de ghnáth de bharr sceitheadh córais. Cad atá le déanamh: Faigh gach nasc, go háirithe an comhéadan ag an dá cheann den cholún, agus déan an limistéar sceite a dhéanamh níos doichte. Bain an post agus bain an scannán PTFE le fórsa cuí.
(2) Téann an gás isteach sa chaidéal, ach is iondúil go mbíonn an brú éagobhsaí ag an am seo, ard agus íseal. Níos dáiríre, ní bheidh na caidéil in ann an sreabhán a ionsú. Modh Cóireála: Oscail an comhla glantacháin agus glan ag ráta sreafa de 3 ~ 5ml/min. Mura bhfuil, rinneadh boilgeoga aeir a asú ag an gcomhla sceite ag baint úsáide as feadán snáthaid tiomnaithe.
.
(4) Níl an comhla tagartha dúnta: tá an comhla tagartha dúnta tar éis luasmhoillithe. De ghnáth téann sé síos go 0.1. ~ 0.2ml/ min tar éis an comhla tagartha a dhúnadh.
Achoimre:
Sa pháipéar seo, ní dhéantar anailís ach ar fhadhbanna coitianta i gcrómatagrafaíocht leachtach. Ar ndóigh, inár bhfeidhmiú praiticiúil, tabharfaimid aghaidh ar níos mó fadhbanna eile. I láimhseáil locht, ba cheart dúinn na prionsabail seo a leanas a leanúint: ná athraigh fachtóir amháin ag an am chun an gaol idir an fachtóir hipitéiseach agus an fhadhb a chinneadh; Go ginearálta, nuair a athsholáthraímid codanna le haghaidh fabhtcheartaithe, ba cheart dúinn aird a thabhairt ar na codanna slán a dhíchóimeáil ar ais chun dramhaíl a chosc; Is é atá i gceist le dea -thaifead a chruthú an eochair do rath láimhseáil locht. Mar fhocal scoir, agus HPLC á úsáid agat, tá sé tábhachtach aird a thabhairt ar réamh -chóireáil shamplach agus ar oibriú agus ar chothabháil chuí an trealaimh.
Iar-am: 2025-07-02