Tá ról tábhachtach aige i bpróisis saoil, i bhfosfathúchán Tyr, Ser, Thr, suite ar peiptídí. Is iondúil go n -úsáidtear an t -aigéad aimín phosphorylated i dtáirgeadh peiptíd aigéid fosfarach, a úsáidtear faoi láthair in aimínaigéid phosphorylated amháin. Is iondúil go n -úsáidtear aimínaigéid HBTU/phosphorylated chun an modh aimínaigéid phosphorylated a cheangal, ach tá lochtanna an chur chuige seo ag roghnú an chur chuige seo, go háirithe sa peiptídí peptide i bhfad níos faide nó i bhfosfáit aimínaigéad, tá nascadh an éifeachtúlachta íseal, tá purity íseal an táirge deiridh. Maidir leis an phosphopeptide seo, mheasamar gur cur chuige roghnach iar-phosphorylation é. Is é an próiseas giniúna deireadh a chur le grúpaí cosanta aimínaigéid taobh-slabhra a chaithfear a lipéadú tar éis sintéise peiptíde. I gcás Tyr, is féidir le THR freagairt go díreach ag baint úsáide as aimínaigéid le slabhraí taobh gan chosaint. -Ser (TRT), a bhaintear go cainníochtúil ag timpeallacht 1%TFA /DCM.
Gintear phosphorylation, le fosfaramid fosfaite beinséine dúbailte agus ceithre nítrigin agus idirmheánacha gníomhacha tetrazolium phosphoramide, atá ceangailte leis an hiodrocsa, ansin faoin bhfoirmiú fosfaireach ocsaídiúcháin sárocsaíd aigéad, imoibriú iomlán.
Faoi láthair, tá dhá phríomhchineál ann: an modh modhnaithe peptide phosphorylated:
(1) tabhairt isteach go díreach ar aimínaigéid phosphorylated atá ráthaithe go measartha isteach sa seicheamh polaipeiptíde;
.
1) An dtabharfaidh ráthaíocht aimínaigéid phosphorylated measartha isteach go díreach seicheamh peiptíde:
Is é sin, déanfar aimínaigéid a chaithfear a phosphorylated a phosphorylated agus a chosaint go cuí roimh ré ag baint úsáide as (Thr, Ser nó Tyr), agus ansin laghdófar an fosfathúchán go dtí pointe roghnaithe an innéacs polaipeiptíde bunaithe ar an ngnáthphróiseas giniúna SPPS. Is furasta an modh seo a oibriú, is é an príomh -mhodh atá ag fiontair peptide modhnú phosphorylated.
2) Tar éis an roisín a ghintear ar an seicheamh peiptíde, le fosfathúchán hiodrocsa, tyr, nó slabhraí taobh:
Maisiú fosfaictrithe ag baint úsáide as fosfathúchán crapadh aonair isteach sa mhodh polaipeiptíde, mar gheall ar an mbaol steiriúil a ghin grúpaí móra sa mhaisiú taobh -slabhra, tá sé deacair do fhosfathú aimínaigéid a laghdú leis an slabhra peiptíde. Sa todhchaí, beidh sé níos deacra aimínaigéid a thabhairt isteach, go háirithe sa mhaisiú ina bhfuil illáithreáin phosphorylation, beidh an ghlúin an -deacair, tá an comhdhéanamh táirge deiridh casta, deacair a dheighilt, agus tá an toradh an -íseal.
Dá bhrí sin, nuair a dhéantar suíomhanna iolracha sa slabhra peiptíde a phosphorylated, is féidir ceann a roghnú chun an t -ord peiptíde a ghiniúint ar an roisín agus ansin é a phosphorylate ag an ngrúpa hiodrocsaile taobh -slabhra de Ser, Tyr, nó Thr: Is éard atá i gceist leis an nginiúint den chuid is mó ná an grúpa cosanta taobh -slabhra a éilíonn aitheantas aigéid aimín aimín a dhéanamh tar éis pyptide. I gcás Tyr, is féidir le THR na slabhraí taobh aimínaigéid a úsáid go díreach mar gheall ar fhreagairt.
Bonn Cosanta Slabhra Taobh Is féidir le timpeallacht TFA/DCM a bhaint go cainníochtúil. Nuair a roghnaítear an modh seo, is féidir idirmheánach tetrazolium phosphoramidite gníomhach a ghiniúint trí úsáid a bhaint as fosfaramidite dibenzyl agus tetrazolium, atá nasctha le grúpa hiodrocsaile, agus ansin ocsaídiú chun grúpa fosfaireach a dhéanamh sa timpeallacht peroxyacid chun an t -imoibriú a chríochnú.
Iar-am: 2025-07-02